*近很多客户问我们的技术小姐姐,“JC-1 是买回来啦,我该怎么用啊?”“MCE 的 JC-1 有简单易懂的 Protocol 吗” 这不,您要的 Protocol 来啦,一看就会,一遍就能记住的那种!
检测设备:荧光显微镜、激光共聚焦显微镜、荧光分光光度计或流式细胞仪 ■ 细胞染色
悬浮细胞和贴壁细胞的使用方法基本相同 (详细说明戳 MCE 产品使用指南丨JC-1 使用指南),我们以贴壁细胞为例:
注:若用荧光分光光度计或流式细胞仪检测贴壁细胞,可先对贴壁细胞进行消化、收集,重悬后参考悬浮细胞的检测方法。若用荧光显微镜或共聚焦显微镜检测,方法如下:
a. 以 6 孔板为例,每孔加入 1mL 细胞培养液。 b. 阳性对照的设置:取适量 CCCP (50 mM) 恢复至室温,阳性对照孔培养基中加入 1 μL,其终浓度为 50 μM,轻摇混匀,细胞培养箱 37℃ 孵育 5 分钟。 c. 取适量 JC-1 (200 μM) 恢复至室温,每孔培养基中加入 10 μL JC-1 (200 μM),其终浓度为 2 μM,轻摇混匀,细胞培养箱 37℃ 孵育 15-20 分钟。
d. 37ºC 孵育结束后, 吸除上清,用 PBS (1×) 洗涤 2 次。
e. 加入 500 μL 的 PBS (1×),用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察 (绿色荧光:Ex/Em=510/527 nm,可用 FITC 通道;红色荧光:Ex/Em=585/590 nm,可用 PE/PI 通道)。 是不是很简单?动动手指,分享一下,再也不用担心师弟师妹不会用 JC-1 啦! Measurement of mitochondria membra ne potential by JC-1 staining. HeLa cells are incubated with or without WOs for 24 h, followed by NIR irradiation for NIR and WOs+ NIR groups (JC-1 purchased from MCE). [1]
1. Fei Wang, et al. Urchin-like tungsten suboxide forphotoacoustic imaging-guided photothermal and photodynamic cancer combinationtherapy. New J Chem. 18 Oct 2017.
原创作者:MedChemExpress