发布时间:2024/8/16 14:45:57 阅读人数:111
描述&优势:T7 Endonuclease I recognizes and cleaves incompletely paired DNA, cruciform structure DNA, Holliday structure or crossover DNA, heterologous double-stranded DNA, or cuts nicked double-stranded DNA at a slower rate. This enzyme cleaves the first, second, or third phosphodiester bond at the 5' end of the mismatched base.
存储条件:-20℃,1 year
使用方法:
1) 分别以突变体DNA和野生型DNA为模板,PCR扩增含突变位点的片段,片段长度约500bp, 突变位点避免位于片段中间,便于区分切割后条带;
2) 变性退火PCR产物
3) 酶切反应:上一步反应液中加入0.5 μL T7 E1酶,37℃保温15-30min,立即加入DNA loading buffer终止反应,混匀后65℃保温10min,琼脂糖凝胶电泳检测酶切结果
注意事项:
1. 用T7核酸内切酶I是一种具有底物结构选择性的酶。该酶以不同的活性作用于不同的DNA底物。切割特定底物时,必须控制酶量和反应时间。反应温度
超过42℃时,会增加非特异性核酸酶活性。避免反应温度超过55℃,会导致酶活性降低。
2. 本产品仅专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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