Ozanimod是一种有效的选择性S1P1和S1P5受体激动剂，在[35S]-GTPγS结合实验中，EC50分别为410±160 pM和11±4.3 nM

体外

Ozanimod（RPC1063）是一种有效的鞘氨醇-1-磷酸受体-1（S1P1）和受体-5（S1P5）激动剂。无论是测量cAMP产生抑制（160±60pM）还是[35S]-GTPγS结合（410±160pM），EC50值对于S1P1受体都是亚纳摩尔的。S1P5受体的EC50值是否测量抑制[35S]-GTPγS结合（11±4.3 nM）。Ozanimod表现出对S1P5受体的激动剂活性[11±4.3nM和83％Emax（刺激的百分比）]。为了确定Ozanimod是否诱导持续的S1P1受体内化，将S1P1受体-HEK293T细胞与10μM存在下的不同剂量的Ozanimod一起温育，以防止新的S1P1受体蛋白的翻译。处理1小时后分析细胞，或者在1小时处理后彻底洗涤以除去Ozanimod并与1μM再孵育24小时。处理1小时后，Ozanimod诱导S1P1受体细胞表面表达的显着丧失，其程度和效力与FTY720-P处理的细胞相似。在处理1小时和24小时洗脱期后，Ozanimod表现出对细胞表面S1P1受体重新表达的剂量依赖性作用，在10nM以上浓度下细胞表面受体表达几乎完全和持续丧失。

体内

Ozanimod（RPC1063）特异于S1P1和S1P5受体，诱导S1P1受体内化并诱导体内循环B和CCR7+T淋巴细胞的可逆减少。Ozanimod显示出高的口服生物利用度和分布容量，以及支持每日一次给药的循环半衰期。口服奥扎莫德减少了所有三种自身免疫疾病模型中的炎症和疾病参数

细胞分析

表达S1P1受体的转染的HEK293T细胞的代表性直方图与媒介物对照或1μMRPC1063一起温育。将HEK293T细胞与递增剂量的Ozanimod（0.01 nM，0.1 nM，1 nM，10 nM，100 nM，1μM和10μM）一起孵育1小时，或1小时，然后进行大量洗涤以去除化合物，然后进行24小时h监测恢复期和细胞表面受体表达。

MCE尚未独立确认这些方法的准确性。它们仅供参考

Animal Administration

Ozanimod is preprared in vehicle(5%DMSO,5%Tween-20,90%0.1 N HCl).

Mice[1]

Female C57BL/6 mice(60 total,10 weeks of age)are immunized with Myelin Oligodendrocyte Glycoproteins(MOG)35-55 peptide with complete Freund＇s adjuvant on day 0,and pertussis toxin is administered 2 h ａnd 24 h later.At the first instance of clinical symptoms of EAE(limp tail),mice are randomized into treatment groups(n=10 per group)and administered the test compound,p.o.,once daily for 14 days.Mice that develop disease earlier than 9 days post-immunization are not enrolled,as these often develop fulminant disease that does not respond to therapy.Test compounds are 0.2 ａnd 0.6 mg/kg Ozanimod,3 mg/kg FTY720 or vehicle(5%DMSO,5%Tween-20,90%0.1 N HCl).Animals are monitored daily for body weight ａnd clinical symptoms ａnd scored.At the end of the study,mice are anaesthetized via inhalation of isoflurane bubbled with oxygen at 10-20 kPa,blood drawn via cardiac puncture to exsanguination ａnd analysed by a veterinary haemoanalyser.

MCE has not independently confirmed the accuracy of these methods.They are for reference only.

更新时间：2024/1/2 10:10:55