BI-D1870是一种特异性强，ATP竞争性RSK抑制剂，抑制RSK1、RSK2、RSK3、RSK4的活性，IC50值分别为31 nM、24 nM、18 nM、15 nM

BI-D1870_RSK抑制剂的生物活性

体外

BI-D1870抑制缺乏C-末端激酶催化结构域（RSK21-389：S381E）的RSK2突变体，IC50约为50。30 nM。当用100μMATP进行激酶测定时，BI-D1870分别抑制RSK1和RSK2，IC50值分别为10nM和20nM。当以低10倍的ATP浓度进行测定时，对于RSK1，BI-D1870的IC50降低至5nM，对于RSK2降低至10nM。BI-D1870抑制PLK1的IC50为100nM，而Aurora B，DYRK1a，CDK2-A，Lck，CK1和GSK3β的IC50值比RSK同种型的IC50值高10-100倍。BI-D1870（10μM）抑制PMA诱导的HEK-293细胞中GSK3α和GSK3β的磷酸化。在HEK-293细胞中，BI-D1870在Ser431处抑制EGF诱导的LKB1磷酸化，IC5​​0为约。1μM。此外，BI-D1870不影响ERK1/ERK2和MSK1的激活，也不抑制CREB的磷酸化[1]。BI-D1870是一种有效的RSK家族激酶抑制剂（Kds：10-100 nM），也可与BRD4（1）和PLK家族相互作用，Kds为3.5μM，大约为10 nM[2]。BI-D1870（10μM）在血清饥饿的LN-229细胞中强烈诱导p70S6K活化，并且alao刺激LN-18细胞中rpS6和p70S6K的磷酸化。BI-D1870（1μM）有效抑制rpS6磷酸化，并在浓度高于1μM时抑制PMA诱导的rpS6磷酸化[4]。BI-D1870（1-5μM）诱导所有细胞类型中细胞增殖的剂量和时间依赖性抑制。BI-D1870（1-3μM）诱导SCC4细胞和HSC-3细胞凋亡。BI-D1870（0-5）剂量依赖性地调节细胞存活信号传导途径，包括Akt和p38MAPK

体内

BI-D1870（0.5mg/kg）注射的实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）小鼠表现出延迟的神经缺陷而没有明显的体重减轻。组织病理学分析显示对照小鼠脊髓中的炎性细胞浸润和脱髓鞘，但在BI-D1870处理的小鼠中没有。BI-D1870可防止TH1或TH17细胞浸润到CNS

BI-D1870_RSK抑制剂的实验方法

Kinase Assay

纯化的His6-RSK1，His6-RSK2或GST-RSK21-389：S381E（1-2单位/mL）在含有30μM底物肽（KEAKEKRQEQIAKRRRLSSLRASTSKSGGSQK）的缓冲液A中的50μL测定混合物中在30℃下测定10分钟。，10mM乙酸镁和100μM[γ-32P]ATP。终止并分析反应。在1分钟内催化1nmol底物肽磷酸化的酶量称为一个单位。MCE尚未独立确认这些方法的准确性。它们仅供参考

Cell Assay

将BI-D1870溶解在DMSO中。

使用MTT[3-（4,5-二甲基噻唑-2-基）-2,5-二苯基-2H-四唑溴化物]测定法重复测量细胞生长，重复六次。将细胞（5×103/200μL）接种在96孔平底板中24小时，然后暴露于各种浓度的测试试剂达指定的时间间隔。除去培养基后，加入200μL含有浓度为0.5mg/mL的MTT的培养基，将细胞在37℃下培养2小时。除去培养基，将每孔中的还原MTT染料溶解在200μLDMSO中。用多模式酶标仪Synergy HT在570nm测定吸光度。MCE尚未独立确认这些方法的准确性。它们仅供参考

更新时间：2024/1/2 10:11:10