Masitinib是一种有效的Kit和PDGFRα/β抑制剂，IC50值为200 nM和540 nM/800 nM，对ABL和c-Fms也有微弱抑制作用

Masitinib生物活性

体外

Masitinib是一种抗ATP的竞争性抑制剂，浓度≤500nM。Masitinib还有效抑制重组PDGFR和细胞内激酶Lyn，并在较小程度上抑制成纤维细胞生长因子受体3.相反，Masitinib显示出对Abl和c-Fms的弱抑制。与伊马替尼相比，Masitinib更强烈地抑制脱颗粒，细胞因子产生和骨髓肥大细胞迁移。在表达人野生型Kit的Ba/F3细胞中，masitinib抑制SCF（干细胞因子）诱导的细胞增殖，IC50为150nM，而抑制IL-3刺激的增殖的IC50约为>10μM。在表达PDGFRα的Ba/F3细胞中，masitinib抑制PDGF-BB刺激的增殖和PDGFRα酪氨酸磷酸化，IC5​​0为300nM。Masitinib还在肥大细胞瘤细胞系和BMMC中引起SCF刺激的人Kit的酪氨酸磷酸化的抑制。Masitinib抑制Kit功能获得性突变体，包括V559D突变体和Δ27小鼠突变体，在Ba/F3细胞中IC50为3和5nM。Masitinib抑制包括HMC-1α155和FMA3在内的肥大细胞瘤细胞的增殖，IC50分别为10和30 nM[1]。Masitinib在两种新型ISS细胞系中抑制细胞生长和PDGFR磷酸化，这表明Masitinib显示出对原发性和转移性ISS细胞系的活性，并可能有助于ISS的临床管理。

体内

Masitinib在30 mg/kg时抑制肿瘤生长并增加表达Δ27的Ba/F3肿瘤模型的中位存活时间，无心脏毒性或遗传毒性[1]。与狗中的安慰剂相比，Masitinib（12.5 mg/kg/d，p.o。）增加总体TTP（肿瘤扩展时间）[3]。Masitinib/吉西他滨的组合在体外对吉西他滨难治性细胞系Mia Paca2和Panc1的增殖具有协同作用，并且在较小程度上对小鼠的Mia Paca-2胰腺肿瘤具有协同作用。

Masitinib实验方法

Kinase Assay

将96孔微量滴定板用0.25mg/mL聚（Glu，Tyr 4：1）包被过夜，用250μL洗涤缓冲液（10mM磷酸盐缓冲盐水[pH7.4]和0.05％吐温20）漂洗两次并干燥在室温下保持2小时。在室温下进行测定，*终体积为50μL，在含有ATP的激酶缓冲液（10mM MgCl 2,1mM MnCl 2,1mM原钒酸钠，20mM HEPES，pH 7.8）中，每种浓度至少为Km的两倍。酶和适量的重组酶确保线性反应速率。引入酶后开始反应，每5mol/Lurea混合物加入一个反应体积（50μL）的100mM EDTA终止反应。将板洗涤三次并与1：30,000辣根过氧化物酶缀合的抗磷酸酪氨酸单克隆抗体一起温育，然后洗涤三次并与四甲基联苯胺一起温育。通过分光光度法在450nm处定量*终反应产物。MCE尚未独立确认这些方法的准确性。它们仅供参考

更新时间：2024/1/2 10:11:10