GSK-690693是一种广谱的Akt抑制剂，作用于Akt1/2/3，IC50值分别为2/13/9 nM；PKA，PrkX和PKC对其也比较敏感

体外

对于Akt同种型，GSK690693对其他家族的大多数激酶具有很高的选择性。然而，GSK690693对AGC激酶家族成员的选择性较低，包括PKA，PrkX和PKC同工酶，IC50分别为24 nM，5 nM和2-21 nM。GSK690693还有效抑制CAMK家族的AMPK和DAPK3，IC50分别为50 nM和81 nM，来自STE家族的PAK4,5和6分别具有10 nM，52 nM和6 nM的IC50。GSK690693抑制肿瘤细胞中GSK3β的磷酸化，IC5​​0范围为43 nM至150 nM。GSK690693处理导致转录因子FOXO3A的核积累的剂量依赖性增加。GSK690693有效抑制T47D，ZR-75-1，BT474，HCC1954，MDA-MB-453和LNCaP细胞的增殖，IC50分别为72 nM，79 nM，86 nM，119 nM，975 nM和147 nM。GSK690693处理在浓度>1时诱导细胞凋亡。LNCaP和BT474细胞均为100 nM[1]。与AKT在细胞存活中的作用一致，GSK690693在敏感的ALL细胞系中诱导细胞凋亡[2]。

体内

单次施用GSK690693以剂量和时间依赖性方式抑制人乳腺癌（BT474）异种移植物中的GSK3β磷酸化。类似地，GSK690693诱导Akt底物，PRAS40和FKHR/FKHRL1的磷酸化降低。GSK690693还导致血糖急剧增加，在给药后8至10小时返回基线。施用GSK690693诱导体内磷酸化Akt底物的减少，并有效抑制人SKOV-3卵巢，LNCaP前列腺和BT474和HCC-1954乳腺癌异种移植物的生长，在剂量为60％时，抑制率为58％至75％。30毫克/千克/天[1]。无论涉及Akt活化的机制如何，GSK690693都显示出功效。GSK690693在延迟Lck-MyrAkt2小鼠肿瘤进展方面*为有效，该小鼠表达一种膜结合的，组成型活性形式的Akt

激酶测定[1]

His标记的全长Akt1,2或3从杆状病毒中表达和纯化。用纯化的PDK1进行活化以磷酸化Thr308并纯化MK2以磷酸化Ser473。为了更准确地测量Akt的时间依赖性抑制，将活化的Akt酶与GSK690693在室温下以各种浓度温育30分钟，然后在加入底物开始反应之前。*终反应含有5nM至15nM Akt1,2和3种酶;2μMATP;0.15μCi/μL[γ-33P]ATP;1μM肽（生物素-氨基己酸-ARKH-ERAYSFGHHA-酰胺）;10mM MgCl2;25mM MOPS（pH 7.5）;1 mM DTT;1 mM CHAPS;和50mM KCl。将反应物在室温下温育45分钟，然后用含有EDTA（终浓度，2mg/mL珠和75mM EDTA）的PBS中的Leadseeker珠终止。然后将板密封，使珠子沉降至少5小时，并使用Viewlux成像仪定量产物形成。MCE尚未独立确认这些方法的准确性。它们仅供参考。

细胞分析[1]

将GSK690693以10mM的浓度溶解于DMSO中。

将细胞以密度铺板，使得未处理的细胞在3天测定过程中以对数方式生长。简而言之，将细胞接种在96孔或384孔板中并孵育过夜。然后用GSK690693（范围从30μM-1.5nM）处理细胞并孵育72小时。使用CellTiter Glo试剂测量细胞增殖。使用适用于Microsoft Excel的XLFit曲线拟合工具分析数据。通过将数据拟合到Eq，2来获得IC 50值.MCE尚未独立地确认这些方法的准确性。它们仅供参考。

Animal Administration[1]

GSK690693在4％DMSO/40％羟丙基-β-环糊精的水溶液（pH6.0）或5％葡萄糖（pH4.0）中配制。

通过注射肿瘤细胞悬液（HCC1954，MDA-MB-453和LNCaP）或肿瘤片段（BT474，SKOV-3和PANC1）s.c.开始肿瘤。在8至12周龄的CD1 Swiss Nude小鼠（LNCaP，SKOV-3和PANC1）或SCID小鼠（HCC1954，MDA-MB-453和BT474）中。当肿瘤达到100至200mm 3的体积时，将小鼠随机分组并分成每组8至12只小鼠。GSK690693每天以10,20和30mg/kg腹膜内给药一次。行政。在研究完成时通过吸入CO 2使动物。使用以下等式每周两次测量肿瘤体积：肿瘤体积（mm 3）=（长度×宽度2）/2。结果报告为治疗第21天的抑制百分比=100×[1-（药物处理群体的平均生长/载体处理的对照群体的平均生长）]。使用双尾t检验进行统计分析。MCE尚未独立确认这些方法的准确性。它们仅供参考

更新时间：2024/1/2 10:11:10